解链温度
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DNA的解链温度(Tm)是引物的一个重要参数,它是当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度,一种DNA分子的Tm值大小与其所含碱基中的G+C比例相关,G+C比例越高,Tm值越高。
Tm=4(G+C)+2(A+T)
Tm值为PCR反应退火温度的重要参考依据。
通常将加热变性使DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的熔点或溶解温度(melting temperature),用Tm表示。当达到Tm时,DNA分子内50%的双链结构被打开,即增色效应达到一半时的温度,它在S型曲线上相当于吸光率增加的中点处所对应的横坐标。